切向流過(guò)濾 (TFF)，也稱為錯(cuò)流過(guò)濾，是生物制藥和生命科學(xué)研究中用于澄清或濃縮細(xì)胞或微生物培養(yǎng)物的常用技術(shù)。在切向流過(guò)濾系統(tǒng)中，進(jìn)料或起始混合物沿過(guò)濾膜表面通過(guò)，而不是垂直通過(guò)。TFF 是一種靈活的工藝，可以進(jìn)行微濾或超濾。過(guò)濾器上的壓力差驅(qū)動(dòng)小于孔徑的分子通過(guò)過(guò)濾器，同時(shí)進(jìn)料溶液繼續(xù)循環(huán)。在切向流過(guò)濾中，較大的組分被截留并沿膜表面通過(guò)，*后流回進(jìn)料罐。進(jìn)料是指被引導(dǎo)至膜表面的溶液。流過(guò)濾膜表面的部分液體是回流液，而通過(guò)膜的溶液是透過(guò)液。
在切向流過(guò)濾系統(tǒng)中，流體在膜表面流動(dòng)會(huì)清除過(guò)濾器表面堆積的物質(zhì)，防止過(guò)濾器堵塞。此外，您還可以再循環(huán)回流液溶液，以便徹底過(guò)濾大樣品量，實(shí)現(xiàn)優(yōu)化純化。
TFF 與直流過(guò)濾的區(qū)別
切向流過(guò)濾和直流過(guò)濾 (NFF) 之間存在三點(diǎn)主要區(qū)別。
- TFF 過(guò)濾器使用膜分離進(jìn)料流中的組分，而 NFF 過(guò)程使用膜、紙或其他過(guò)濾材料，如玻璃纖維。
- 自動(dòng)切向流過(guò)濾系統(tǒng)允許回流液溶液進(jìn)行再循環(huán)，而在 NFF 中進(jìn)料僅可通過(guò)過(guò)濾器一次。
- 在 TFF 系統(tǒng)中，回流液留在溶液中可以進(jìn)行回收。但是，NFF 需要對(duì)過(guò)濾器收集的材料進(jìn)行重懸之后才能進(jìn)一步處理。
TFF 廣泛用于生物制藥的研究、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)，包括：
- 細(xì)胞收獲
- 細(xì)胞或裂解物的澄清
- 產(chǎn)品分餾
- 產(chǎn)品濃縮
- 洗濾
切向流過(guò)濾系統(tǒng)通常包括以下組件：
- 泵和閥門(mén)：一個(gè)或多個(gè)泵控制過(guò)濾系統(tǒng)中的液體流動(dòng)。進(jìn)料泵使進(jìn)料持續(xù)流入過(guò)濾器，而回流液泵可控制回流液流量。許多 TFF 系統(tǒng)使用透過(guò)液泵來(lái)管理通過(guò)過(guò)濾器的透過(guò)液流量。有些特色輸送泵可以控制向進(jìn)料罐中添加緩沖液的流量。帶有限流器的閥門(mén)有助于調(diào)節(jié)不同過(guò)程管線中的流量。通過(guò)控制泵轉(zhuǎn)速和閥門(mén)限流可以在膜上產(chǎn)生壓力。
- 壓力傳感器：進(jìn)料和回流液管線中的傳感器可以進(jìn)行過(guò)程監(jiān)控以實(shí)現(xiàn)*生產(chǎn)率。
- 流量傳感器：流量傳感器放置在關(guān)鍵點(diǎn)，用于監(jiān)測(cè)進(jìn)料溶液、透過(guò)液和回流液的流速。
- 進(jìn)料罐液位傳感器：監(jiān)測(cè)進(jìn)料罐中的液體體積。
- 空氣傳感器：空氣傳感器位于進(jìn)料流中，有助于連續(xù)監(jiān)測(cè)進(jìn)料中的氣泡，以限制空氣進(jìn)入切向流過(guò)濾系統(tǒng)。還有其他傳感器，用于監(jiān)測(cè) pH 值、溫度、電導(dǎo)率和紫外等參數(shù)。
切向流過(guò)濾系統(tǒng)常見(jiàn)問(wèn)題解答
以下是有關(guān)切向流過(guò)濾系統(tǒng)的一些常見(jiàn)問(wèn)題的解答。
什么是切向流過(guò)濾系統(tǒng)？
切向流過(guò)濾系統(tǒng)包括過(guò)濾或濃縮液體（例如細(xì)胞裂解物或微生物細(xì)胞培養(yǎng)物）所需的組件和功能。例如，在上游應(yīng)用程序中，?KTA readyflux? 切向流過(guò)濾系統(tǒng)可以連接生物反應(yīng)器系統(tǒng)，用于細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)料的澄清。在下游應(yīng)用中，?KTA readyflux? TFF 系統(tǒng)可以連接 ?KTA ready? 一次性層析系統(tǒng)用于濃縮和緩沖液更換。Cytiva 提供適用于各種規(guī)模的一次性和傳統(tǒng) TFF 系統(tǒng)，以及一次性和傳統(tǒng)中空纖維濾器。
與 NFF 相比，TFF 有什么優(yōu)勢(shì)？
- TFF 可以形成防止“濾餅”，因而可以連續(xù)使用。
- 在 TFF 中，過(guò)程進(jìn)料保持流動(dòng)漿液的形式，適合進(jìn)行進(jìn)一步處理。
- 與 NFF 不同，在 TFF 過(guò)程中可以按顆粒大小進(jìn)行分餾。
為什么要使用 TFF？
在 TFF 過(guò)程中，流過(guò)膜的流體可以去除膜表面的顆粒，從而實(shí)現(xiàn)連續(xù)運(yùn)行。
參考鏈接：切向流過(guò)濾系統(tǒng)_思拓凡官網(wǎng) | Cytiva
